技術文章
Technical articles二氧化碳培養(yǎng)箱廣泛應用于醫(yī)學、**學、遺傳學、微生物、農(nóng)業(yè)科學、**學的研究和生產(chǎn),已經(jīng)成為上述領域實驗室*普遍使用的常規(guī)儀器之一,其通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境如恒定的酸堿度(pH值: 7.2~7.4) 、穩(wěn)定的溫度(37C)、較高的相對濕度(95%)、穩(wěn)定的C02水平(5%) ,來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。二氧化碳培養(yǎng)箱的選購。
?全**的用戶對二氧化碳培養(yǎng)箱都有兩條*基本的要求,一是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠對溫度、二氧化碳濃度和濕度提供***穩(wěn)定的控制,以便于其研究工作的進展;二是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠對培養(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進行有效的防范,并且能夠定期消除污染,以保護研究成果,防止樣品損失。所以,選購二氧化碳培養(yǎng)箱的老師*關心的當然就是其高可靠性、對污染的防范和控制及使用方便。
一、溫度控制
1.加熱方式:
氣套式加熱和水套式加熱,兩種加熱系統(tǒng)都是**和可靠的,同時它們都有著各自的*點和缺點。水套式加熱是通過--個*立的水套層包圍內(nèi)部的箱體來維持溫度恒定的,其*點:水是--種很好的*熱物質,當遇到斷電的時候,水套式系統(tǒng)就可以比較長時間的保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度**性和穩(wěn)定性(維持溫度恒定的時間是氣套式系統(tǒng)的3~4倍),有利于實驗環(huán)境不太穩(wěn)定(如有用電限制,或者經(jīng)常停電)并需要保持長時間穩(wěn)定的培養(yǎng)條件的用戶選用。氣套式加熱是通過遍布箱體氣套層內(nèi)的加熱器直接對內(nèi)箱體進行加熱的,又叫六面直接加熱。氣套式與水套式相比,具有加熱快,溫度的恢復比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點,特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關的培養(yǎng)。此外,對于使用者來說氣套式設計比水套式更簡單化( 水套式需要對水箱進行加水、清空和清洗,并要經(jīng)常監(jiān)控水箱運作的情況)。
2.溫控系統(tǒng):
保持培養(yǎng)箱內(nèi)恒定的溫度是維持細胞健康生長的重要因素,因此**可靠的溫控系統(tǒng)是培養(yǎng)箱*的重要部分。為了使培養(yǎng)箱更加穩(wěn)定的工作,我們推薦用戶選用具備相互*立三重溫度控制功能的二氧化碳培養(yǎng)箱,即箱內(nèi)溫度控制、超溫報警控制和環(huán)境溫度監(jiān)控。
我們知道培養(yǎng)箱的*低工作溫度一般是高于室溫5C, 如果沒有緩慢加熱模式就非常容易在夏天高溫天氣(如室溫30C左右時)產(chǎn)生箱內(nèi)溫度過高;HF90的*立超溫報警功能能夠快速**的在培養(yǎng)箱內(nèi)溫度高于培養(yǎng)溫度1C時,切斷培養(yǎng)箱的主加熱系統(tǒng),同時聲光報警;HF90的環(huán)境溫度監(jiān)控可以根據(jù)環(huán)境溫度的變化自動調節(jié)培養(yǎng)箱外門輔助加熱系統(tǒng)的功率,達到**控制箱體內(nèi)溫度的目的。
3.溫度均一性:
二氧化碳培養(yǎng)箱箱體內(nèi)的溫度均一性也是用戶需要考慮的主要因素,-般在箱體內(nèi)配備了風扇以及風道的培養(yǎng)箱的均一度要好很多,同時此裝置還有助于箱內(nèi)溫度、C02濃度和相對濕度的迅速恢復。
當然,風扇/風道的*化也是同等重要的,HF90二氧化碳培養(yǎng)箱*特設計的大直徑風扇和循環(huán)風道能郇夠*箱體內(nèi)溫度和二氧化碳濃度的均一性。大直徑風扇相比其他*培養(yǎng)箱的風扇,能夠在低轉速( 低風速)時產(chǎn)生大的空氣循環(huán)流量,在達到均一性目的的同時,降低風速、減少箱內(nèi)震動。降低風速、減少震動同時也就大大提高了箱內(nèi)細胞培養(yǎng)的成功率。
二、二氧化碳濃度控制
1.兩種控制系統(tǒng):
紅外傳感器(IR) 或熱導傳感器(TCD) 進行測量。兩種傳感器都是**的,但都各有*缺點。熱導傳感器監(jiān)控C02濃度的工作原理是基于對內(nèi)腔空氣熱導率的連續(xù)測量,輸入co2氣體的低熱導率會使腔內(nèi)空氣的熱導率發(fā)生變化,這樣就會產(chǎn)生一個與C02濃度直接成正比的電信號。紅外傳感器(IR) 它是通過一個光學傳感器來檢測C02水平的。IR系統(tǒng)包括一個紅外發(fā)射器和一一個傳感器,當箱體內(nèi)的C02吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后,傳感器就可以檢測出紅外線的減少量,而被吸收紅外線的量正好對應于箱體內(nèi)C02的水平,從而可以得出箱體內(nèi)C02的濃度。由于IR系統(tǒng)是通過紅外線減少來確定箱內(nèi)C02濃度,而箱體內(nèi)顆粒物能夠反射或部分吸收紅外線,使得IR系統(tǒng)對箱體內(nèi)顆粒物的多少比較敏感,因此IR傳感器應用在含HEPA高效空氣過濾器的培養(yǎng)箱內(nèi)比較合適。
2. C02測量系統(tǒng)自動校準功能:
無論哪種C02測量系統(tǒng)在使用一段時間后都會產(chǎn)生漂移,而產(chǎn)生漂移后直接會導致箱體內(nèi)二氧化碳濃度不能穩(wěn)定在我們的設定值,致使培養(yǎng)失敗,所以我們在這里強烈建議用戶在選購培養(yǎng)箱時必須要選擇帶有CO2測量系統(tǒng)自動校準功能的培養(yǎng)箱。
3. C02濃度均一性:此點與溫度均一性的要求類似,在此就不做贅述。
三、相對濕度
箱內(nèi)濕度對于培養(yǎng)工作來說是一項非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。維持足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復速度(如在開關門后)才能**不會由于過度干燥而導致培養(yǎng)失敗。目前大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是通過增濕盤的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的(其產(chǎn)生的相對濕度水平可達95%左右,但開門后濕度恢復速度很慢)。我們在此建議用戶在選購二氧化碳培養(yǎng)箱的時候盡量選擇濕度蒸發(fā)面積大的培養(yǎng)箱,因為我們知道濕度蒸發(fā)面積越大,越容易達到*大相對飽和濕度大相對飽和濕度并且開關門后的濕度恢復的時間越短。
四、防污染設計和****系統(tǒng)
污染是導致細胞培養(yǎng)失敗的一一個主要因素,因而,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們設計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面,并結合自動排除污染裝置來有效防止污染的產(chǎn)生。例如,鑒于C02培養(yǎng)箱在使用過程中有時會伴有霉菌生長,為確保培養(yǎng)箱免受污染并且**儀器箱體內(nèi)的生物清潔性,相繼問世了多種****方式,如帶有紫外**功能的C02培養(yǎng)箱;還有的設計生產(chǎn)了HEPA過濾器能過濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣,可過濾除去99. 97%的0. 3微米以上的顆粒;此外,還開發(fā)設計了能使箱內(nèi)達到高溫濕熱的環(huán)境從而殺死污染微生物,達到**** 目的的培養(yǎng)箱。這些裝置對于細胞培養(yǎng)來說是*,但選擇何種清潔裝置呢?首先,我們考慮的當然是各種方式的**能力,紫外**能力是與紫外燈距離目標的距離的二次方成反比,距離越遠,**能力越差,所以紫外**方式有其局限性,難以達到***的要求; HEPA過濾器由于受到過濾膜孔徑的影響,無法去除病毒和一些微小**,也有其局限性;相比較而言,高溫**是目前比較有效***的方法,高溫**又分為兩類,-是傳統(tǒng)的高溫干熱**,另-種是**的高溫濕熱**。
接下來我們重點說一下高溫干熱和高溫濕熱兩種方法的優(yōu)劣。高溫濕熱由于蒸汽潛熱大,穿透力強,容易使蛋白質變性或凝固,因此該法的**效率比干熱**法高。
其原因有三:
①蛋白質凝固所需的溫度與其含水量有關,含水量愈大,發(fā)生凝固所需的溫度愈低。濕熱**的菌體蛋白質吸收水分,所以較同一溫度的干熱空氣中易于凝固。
②濕熱**過程中蒸汽放出大量潛熱,加速提高濕度。因而濕熱**比干熱所需溫度低,如在同一溫度下,則濕熱**所需時間比干熱短。
③濕熱的穿透力比干熱大,使其深部也能達到**溫度,故濕熱比干熱收效好一些。
所以高溫**并不是簡單的看**溫度,主要是看是否濕熱**.另外,從使用角度看,濕熱**-般控制在90C就能達到很*的**效果,整個**過程中培養(yǎng)箱內(nèi)的**附件都不用取出,可以全部進行**;而干熱**為了達到較好的效果,溫度-般都在100C以 上,在這種溫度下**培養(yǎng)箱內(nèi)的傳感器、HEPA過濾器等都要在**過程中取出,等**結束再裝上,這樣即麻煩,附件又不能同時**,而且增加二次污染的幾率,再者要達到100C以上的高溫,培養(yǎng)箱的加熱系統(tǒng)的電熱絲必然要加粗,這會導致培養(yǎng)箱的溫度控制難度增加,均--性變差。所以我們建議用戶在選購二氧化碳培養(yǎng)箱時選擇含高溫濕熱**方式的培養(yǎng)箱。
五、其它因素
二氧化碳培養(yǎng)箱的容積也是-一個不可忽略的因素,買小了不夠用,大了又浪費又占地方。二氧化碳培養(yǎng)箱的可選容積非常廣,而且每種類型又有不同的容積可選。此時,就需要您在選購前對所需培養(yǎng)箱容積的范圍有-一個比較**的了解,并在此基礎上多預留一點空間,以備不時之需。
此外,每一個使用者都希望所用的儀器能夠方便好用,微處理控制系統(tǒng)和其它各種功能附件(如高溫自動調節(jié)和警報裝置、C02警報裝置、密碼保護設置、自動校準系統(tǒng)、LCD顯示系統(tǒng)等等)的運用,就使得二氧化碳培養(yǎng)箱的操作和控制都非常的簡便。不同的微處理系統(tǒng)雖然名字不相同,但是其原理與控制效果則無甚區(qū)別,選購時不必太在意它們名字上的區(qū)別,關鍵是要自己覺得使用起來方便,容易操作。